Depyrogenizacja oznacza usuwanie pirogenów z urządzeń farmaceutycznych. Pirogeny to substancje wywołujące gorączkę. Zarówno egzotoksyny, jak i endotoksyny mogą być pirogenami, ale najczęściej występujące pirogeny są zazwyczaj endogenne dla gospodarzy, więc są to głównie endotoksyny. Endotoksyny są głównie cząsteczkami lipopolisacharydu (LPS), które są częścią bakteryjnych ścian komórkowych bakterii Gram-ujemnych i są zwykle uwalniane po lizie komórek bakteryjnych. Po uwolnieniu endotoksyny stają się pirogeniczne, jeśli dostaną się do krwioobiegu lub tkanek, w których normalnie ich nie znaleziono.
Depyrogenizacja urządzeń w sterylnej produkcji farmaceutycznej pomaga zmniejszyć ryzyko zanieczyszczenia preparatów farmaceutycznych patogenami i poprawić bezpieczeństwo farmaceutyków.
Maksymalny dopuszczalny poziom endotoksyny:
Aby endotoksyny powodowały gorączkę, muszą osiągnąć określoną liczbę krytyczną w krwioobiegu lub tkance. Dlatego podczas sterylizacji urządzeń farmaceutycznych do usuwania pirogenów mierzony jest stopień sterylności w stosunku do poziomów endotoksyny. Niemniej jednak masa cząsteczkowa endotoksyn zwykle zmienia się znacznie (od 10 000 do 1 000 000 Da), a zatem dopuszczalny poziom jest mierzony w jednostkach endotoksyn (UE). Pojedyncza jednostka endotoksyny (EU) odpowiada około 100 pikogramom (pg) lipopolisacharydu E. coli. Jednak ludzie mogą dostać gorączki, gdy są narażeni tylko na 5 EU / kg masy ciała, a objawy mogą obejmować przyspieszenie akcji serca, niskie ciśnienie krwi i niską produkcję moczu. W rzeczywistości nawet bardzo małe ilości endotoksyn we krwi mogą być śmiertelne.
Depyrogenizacja urządzeń w sterylnej produkcji farmaceutycznej powinna pomóc zminimalizować ilość pirogenów, do których leki iniekcyjne mogą uzyskać dostęp za pośrednictwem urządzeń. Maksymalne dopuszczalne wartości endotoksyny w produktach leczniczych powinny wynosić od 0,25 do 0,5 EU / ml dla jałowej wody (w zależności od zamierzonego zastosowania), 5 EU / kg masy ciała w przypadku dooponowych produktów leczniczych i 0,2 EU / kg masy ciała w przypadku dooponowych produktów leczniczych. Przed usunięciem pirogenów stosuje się metody wykrywania, takie jak test na królikach i test na lizat amebocytów Limulus (LAL) w celu ustalenia obecności pirogenów.
Metody depyrogenizacji urządzeń farmaceutycznych:
Depyrogenacja urządzeń w sterylnej produkcji farmaceutycznej jest kluczowym elementem i jest zapewniona przez dział kontroli jakości. Wszystkie instrumenty stosowane w analizie endotoksyn powinny zostać poddane depirogenizacji w celu zwiększenia dokładności wyników. Na przykład probówki i inne akcesoria (akcesoria) są zwykle usuwane z pirogenów za pomocą sterylizatora na sucho (DHS) w temperaturze 300 ° C. Fiolki należy również poddać depirogenizacji tunelem do depirogenizacji w suchym cieple o temperaturze 300 ° C. Szklane fiolki do procesów farmaceutycznych należy poddać depirogenizacji przy użyciu kombinacji temperatury komory i prędkości taśmy. Części, korki i inne akcesoria do urządzeń farmaceutycznych należy umyć wodą do wstrzykiwań (WFI) w autoklawie przed sterylizacją. Następnie należy przepłukać wodę do wymiany części zamiennych i zatyczek pod kątem endotoksyn, aby potwierdzić usunięcie pirogenów. Ze względu na rozmiar endotoksyn często stosuje się ultrafiltrację do przeprowadzania depyrogenizacji na podstawie wielkości.
Jednak ze względu na trudność w wyborze najbardziej odpowiedniej membrany, metoda jest preferowana tylko wtedy, gdy pirogeny ważą 300 000 Da i więcej. Depyrogenacja przez destylację korzysta ze stabilności cieplnej i wysokiej masy cząsteczkowej endotoksyn. Urządzenia są czyszczone przy użyciu rozpuszczalników o niskiej masie cząsteczkowej, które gotuje się w celu odparowania, zanim skroplona para zostanie zebrana w naczyniu wolnym od endotoksyn. Depyrogenację osiąga się także przez hydrolizę kwasowo-zasadową, utlenianie, wodorotlenek sodu oraz chromatografię anionową i kationowymienną.
[ff id=”7″]